Das Projekt "BioIndustrie2021 - CLIB2021: Entwicklung von Hochdurchsatzverfahren zur Herstellung aktiver Enzyme im Maßstab von myg bis Gramm" wird vom Umweltbundesamt gefördert und von Protagen AG durchgeführt. Im Rahmen des Projektes 'BioIndustrie2021 - CLIB2021: Verbundprojekt: Entwicklung von Hochdurchsatzverfahren zur Herstellung aktiver Enzyme im Maßstab von Mikrogramm bis Gramm' sollen durch die Entwicklung von Hochdurchsatzmethoden neue, industriell oder therapeutisch nutzbare Enzyme in unterschiedlichen Quantitäten für Screeningzwecke bereitgestellt werden. Im Fokus steht dabei das Enzymrepertoire an Oxidoreduktasen, Transferasen sowie Hydrolasen aus humaner Leber und Pankreas. Zur Erstellung der Enzymbibliothek werden Hochdurchsatz-Klonierungsstrategien etabliert. Es werden weiterhin Methoden zur Hochdurchsatz-Zellanzucht, zur effizienten Zelllyse sowie zur Hochdurchsatz-Proteinreinigung mit anschließender Elution der Proteine mit Hilfe verschiedener physiologischer Puffer entwickelt. Im Rahmen der Herstellung von Enzymen im Milligramm-Maßstab soll die parallele Expression und Reinigung einer großen Anzahl an Enzymen etabliert werden. Zur Produktion funktionaler Enzyme im Gramm-Maßstab sollen Fermentationsmethoden zur Hochzelldichtefermentation von Escherichia coli im Bioreaktor etabliert werden. Neben dem Expressionswirt Escherichia coli soll der alternative bakterielle Expressionswirt Rhodobacter capsulatus verwendet werden. Auch Insektenzelllinien sowie humane Zelllinien sollen zur Enzymproduktion verwendet werden. Ziel ist es, mit der Etablierung dieser Methoden Enzyme, die bislang nicht oder in nicht ausreichender Menge oder Qualität verfügbar waren, für die Nutzung in vielfältigen Bereichen der Biotechnologie zur Verfügung zu stellen, um so langfristig neue biotechnologische Prozess- und Produktentwicklungen zu ermöglichen.