Das Projekt "Resistenz gegen europaeische Kern- und Steinobstphytoplasmen durch Expression rekombinanter Antikoerper gegen phytoplasmaspezifische Membranproteine" wird vom Umweltbundesamt gefördert und von Biologische Bundesanstalt für Land- und Forstwirtschaft durchgeführt. Apfeltriebsucht, Birnenverfall und europaeische Steinobstvergilbung sind wichtige Krankheiten im Obstbau, die mit den verfuegbaren Moeglichkeiten nicht zufriedenstellend bekaempft werden koennen. In dem Projekt sollen daher durch die Expression rekombinanter, Phytoplasma-spezifischer Antikoerper resistente Pflanzen entwickelt werden. Dabei werden aus Genfragmenten, die fuer die variablen Regionen der leichten und schweren Kette der Immunoglobuline kodieren, Konstrukte fuer die Transformation hergestellt. Die Versuche zur Expression von 'single-chain variable fragment' (scFv) Antikoerper sollen zunaechst mit der Modellpflanze Tabak durchgefuehrt und spaeter auf Obstgehoelze ausgedehnt werden.
Das Projekt "BioIndustrie 2021 - Clib 2021: Präparatives zellfreies eukaryotisches System für die Darstellung von Antikörperfragmenten, posttranslational modifizierten Proteinen und Membranproteinen" wird vom Umweltbundesamt gefördert und von Rina-Netzwerk RNA Technologien GmbH durchgeführt. Ziel dieses Vorhabens ist es, ein System mit hoher Syntheseausbeute und Qualität für Fab Antikörper und glykosylierte sowie Membranproteine aufzubauen. Dazu soll das etablierte Verfahren der zellfreien Proteinsynthese basierend auf Insektenzellen mit der Technologie der 'Continous Exchange Cell-Free' (CECF) Proteinsynthese verknüpft und als robuste Methode etabliert werden. Dabei sollen erstmalig die von der pharmazeutischen Industrie geforderten Syntheseausbeuten erreicht werden. Ausgangspunkte sind RiNAs eukaryotisches Proteinsynthesesystem, mit dem bereits Glykoproteine und einfache Membranproteine in Vesikel synthetisiert werden sowie ein System zur Herstellung disulfidverbrückter Proteine wie z.B. Antikörperfragmente in analytischer Menge. Diese sollen durch biochemische Anpassungen vereint und anschließend mit dem CECF Verfahren kompatibel gemacht werden. Die Projektteile umfassen (I) die generelle Leistungssteigerung des Systems durch biochemische Optimierung, (II) die Generierung und den Einsatz funktionalisierter Membranvesikel sowie (III) die Evaluierung der erstellten Protokolle durch die Produktion und Qualitätsanalyse ausgewählter Membranproteine mit pharmakologischer Relevanz.