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Veraenderung des Biosynthesespektrums zellwandlytischer Enzyme bei Pilzen durch homologe und heterologe Transformation

Das Projekt "Veraenderung des Biosynthesespektrums zellwandlytischer Enzyme bei Pilzen durch homologe und heterologe Transformation" wird vom Umweltbundesamt gefördert und von Technische Universität Berlin, Fachbereich 15 Lebensmittelwissenschaft und Biotechnologie, Wissenschaftsbereich Mikrobiologie durchgeführt. Veraenderte Enzymbildung zellwandlytischer Pilze kann durch Veraenderungen auf Transkriptions-, Translations- oder Sekretionsebene verursacht sein. Ziel des Projektes ist es, durch Amplifikation vorhandener Gene und Transformation mit heterologen Genen die Enzymbildung gezielt zu beeinflussen. Dabei sind die Auswirkungen zusaetzlicher Gene bzw die Ausschaltung eigener Gene durch Insektionsinaktivierung auf die Expressionskapazitaet des von Penicillium janthinellum gebildeten zellwandabbauenden Enzymkomplexes von besonderem Interesse. Dazu soll ein wirksamer Expressionsvektor auf der Basis der Nourseothricin-Resistenz als dominantem Selektionsmarker konstruiert und in Verbindung mit Expressionskassetten fuer einzelne Gene zellwandlytischer Enzyme eingesetzt werden. Transformationsereignisse und Stabilitaet von Transformanten sollen ua durch Genomanalyse mittels Puls-Feld-Elektrophorese untersucht werden.

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