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Teil 3: Praeparative Darstellung von rekombinantem Oestrogen- und Ah-Rezeptor

Das Projekt "Teil 3: Praeparative Darstellung von rekombinantem Oestrogen- und Ah-Rezeptor" wird vom Umweltbundesamt gefördert und von Universität Stuttgart, Institut für Technische Biochemie, Zentrum für Bioverfahrenstechnik durchgeführt. Ziel des Teilprojektes ist die Produktion und Charakterisierung von Bindeproteinen, die fuer eine direkte wirkungsbezogene Analytik geeignet sind. Dazu sollen Regulationsproteine rekombinant hergestellt werden, die bestimmte Xenobiotika binden und dadurch die Induktion von Cytochrom P4501A1 ausloesen. Dabei werden die Arylkohlenwasserstoffrezeptoren (AhRs) aus Regenbogenforellen sowie ligandbindende Fragmente der Rezeptoren (LBDs: Ligand Binding Domans) mit His-tag als Ankergruppe in einem Hefeexpressionssystem hergestellt. Die in vivo zur Bindung benoetigten Heat-Shock-Proteine (HSP) werden falls noetig, ebenfalls in dem Hefeexpressionssystem produziert. Ein Schwerpunkt dieses Teilprojektes ist die Aufreinigung der rekombinanten Proteine dieses Teilprojektes, sowie des in der AG Hock produzierten humanen Oestrogenrezeptors. Zur Charakterisierung und Qualitaetssicherung dieser Rezeptoren und der Regulationsproteine wird ein optischer Biosensor fuer die biomolekulare Interaktionsanalyse (SPR) verwendet. Nach erfolgter Charakterisierung werden die in diesem Teilprojekt hergestellten Materialien der AG Obst fuer die einstufige wirkungsbezogene Analytik zur Verfuegung gestellt.

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